Oct4基因转染对人牙髓细胞增殖和多向分化能力的影响

作者：张芳; 刘路; 韦曦

来源：中华口腔医学研究杂志(电子版), 2013, (03): 178-183.

• 牙髓细胞
• 转录因子Oct4
• 增殖
• 多向分化 Dental pulp cells
• Transcription factor Oct4
• Proliferation
• Multilineage differentiation

目的研究腺病毒介导的转录因子Oct4转染人牙髓细胞(DPCs)对其增殖和多向分化能力的影响。方法以Admax包装系统构建携带目的基因Oct4和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的腺病毒载体Ad5-Oct4-EGFP,筛选最佳感染复数(MOI)转染DPCs,检测其增殖及成牙本质、成脂分化能力的改变。结果采用Admax包装系统成功构建并获得高滴度的腺病毒载体,筛选最适MOI=200,CCK-8检测结果显示,Ad5-Oct4-EGFP组2d起吸光度(A)值高于对照组,7、14d与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),矿化诱导21d后,茜素红染色显示Ad5-Oct4-EGFP组与对照组相比,矿化结节数量多且体积最大,实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)结果显示,DSPP、BSP和CollagenⅠmRNA的表达量高于对照组(P<0.05);成脂诱导后细胞胞体呈立方状,油红O染色显示Ad5-Oct4-EGFP组细胞浆内出现较多脂滴,脂肪特异性标志LPL和PPARγ2mRNA水平较对照组显著上调(P<0.05),Ad5-EGFP和空白对照组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论转录因子Oct4可促进DPCs增殖和多向分化能力,改善DPCs的干性。

• 单位
  中山大学光华口腔医学院