尖吻蝮蛇类凝血酶在大肠杆菌中的表达及其优化

作者：程欲; 缪少锋; 李仁宽; 陈菁; 刘树滔; 饶平凡

来源：福州大学学报(自然科学版), 2013, (02): 252-256.

• 类凝血酶
• acutobin
• 原核表达
• 尖吻蝮蛇 thrombin-like enzyme
• acutobin
• prokaryotic expression
• deinagkistrodon acutus

将尖吻蝮蛇类凝血酶基因克隆到载体pET32a(+)上,在大肠杆菌Rosetta2(DE3)中表达N端融合了硫氧还原蛋白的类凝血酶.通过SDS-PAGE检测融合蛋白条带,纤维蛋白原凝结实验检测酶学活性.确定表达菌株后,对其诱导条件进行优化,在30℃诱导3 h,诱导剂IPTG浓度为0.5 mmol·L-1条件下类凝血酶表达水平最高.

• 单位
  福州大学