利用DNA条形码检验中药制剂中的羚羊角药材

作者：张龙霏; 陈绍民; 田景振; 张永清

来源：中草药, 2014, (23): 3467-3471.

• 羚羊角
• 细胞色素C氧化酶亚基I
• DNA条形码
• 中药制剂
• PCR扩增

目的研究以线粒体细胞色素C氧化酶亚基I(COI)基因作为DNA条形码检验中药制剂中羚羊角的可行性。方法以不同厂家生产的8种含羚羊角中药制剂为材料,经充分研磨后,采用DNA提取试剂盒提取样品中DNA,以引物LCO1490和HCO2198或特异性引物0703扩增线粒体COI基因片段序列,PCR产物直接双向测序,将测序结果在Gen Bank中进行BLAST比对,并以DNAMAN和MEGA5.2软件构建同源树和NJ树,以赛加羚羊(gb|JN632700.1)和羚羊角标准药材序列为对照,判定制剂中羚羊角的真实性,并以Kimura-2-parameter模型计算种内、种间遗传距离。结果 8种中药制剂中羚羊角的COI基因序列长度均为658 bp,在同源树和NJ树中可与赛加羚羊和羚羊角标准药材聚成一支,并与outgroup完全分开。种内遗传距离为0~0.064,平均遗传距离为0.020,种间遗传距离为0.167~0.195。结论以线粒体COI基因作为DNA条形码检验中药制剂中羚羊角方法是可行的,但因羚羊其他器官也含有相同基因,为保证检验结果的准确性,还需配合使用其他检验方法。

• 单位
  山东中医药大学