摘要
目的通过构建小鼠急性肺损伤(ALI)模型,观察单免疫球蛋白白细胞介素1受体相关蛋白(SIGIRR)在正常小鼠及ALI小鼠模型肺组织中的表达规律,为SIGIRR在ALI预防及治疗方面的应用提供基础。方法将30只雄性BALB/C小鼠随机分为对照组及脂多糖(LPS)组,每组15只。腹腔注射戊巴比妥钠麻醉满意后,行气管插管,呼吸机辅助呼吸。气管内缓慢滴入LPS溶液(1 mg/kg,500/μg)构建ALI模型。对照组按上述操作步骤,气管内注射人生理盐水。观察小鼠肺弹性阻力的变化;肺水肿程度观察;肺组织病理切片HE染色后光镜下观察肺组织病变情况;收集小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF),FLSA法检测细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和IL-6浓度;收集肺组织,ELISA法检测肺组织匀浆内一氧化氮(NO)浓度和髓过氧化物酶(MPO)活性;免疫组化检测肺组织中SIGIRR表达,Western blot检测各个时间点肺组织SIGIRR表达水平的变化。结果模型小鼠肺弹性阻力较对照组明显上升;模型小鼠肺组织湿/干重比值较对照组明显增高;模型小鼠肺组织的病理呈现典型的ALI病理改变特征,对照组小鼠则表现为正常的肺组织病理学特点;模型建立3 h后,ELISA法检测ALI小鼠BALF中IL-1β、TNF-α及IL-6浓度分别为(517±18)pg/mL.、(3523±168)pg/mL和(676±25)pg/mL,显著高于对照组(P<O.05);ELISA法检测模型小鼠肺组织匀浆液中NO的浓度和MPO的活性分别为(88.1±2.6)μmol/mL和(215±7)μIU/mL,显著高于对照组(P<0.05);免疫组化染色提示SIGIRR在正常的小鼠肺组织中存在表达,主要分布于肺泡及气道上皮细胞;模型小鼠肺组织Western blot结果表明:LPS诱导小鼠ALI后1h,SIGIRR的表达即开始下降,3 h后降至最低,随后缓慢恢复,至24 h时基本恢复正常表达水平。结论 SIGIRR在正常的小鼠肺组织中存在表达,主要分布于肺泡及气道上皮细胞,IPS诱导小鼠ALI后SIGIRR的表达短期内下降,至24 h后基本恢复正常表达水平。
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单位中国人民解放军第四军医大学