DJ-1蛋白的原核表达纯化及在中药评价中的应用

摘要

目的:建立DJ-1蛋白原核表达及纯化的技术体系,通过SPR技术评价中药化合物。方法:采用大肠杆菌BL21(DE3)感受态细菌,通过热休克法和IPTG诱导,对GST标记的WT DJ-1蛋白进行原核表达,对GST标签进行切割,采用亲和层析法进行纯化,并通过SPR技术,对7个中药多酚类单体化合物进行WT DJ-1蛋白结合筛选。结果:原核表达并纯化得到高纯度的WT DJ-1蛋白,通过SPR技术筛选出1个与WT DJ-1蛋白有结合的化合物3-O-去甲紫药双口山酮苷(3-O-demethylswertipunicoside,3-ODS)。结论:成功建立了DJ-1蛋白原核表达及纯化的技术体系,可用于评价与DJ-1蛋白结合的化合物。

关键词