Summary
[目的]探讨苯并(a)芘(BaP)对大鼠原代培养睾丸支持细胞的连接蛋白(connexin 43、occludin、ZO-1、N-cadherin)基因mRNA表达的影响及可能机制。[方法]取出生21d SD大鼠睾丸组织,分离支持细胞,细胞分离后,均按照1.5×106个/mL浓度接种于细胞培养板中。培养48h后,以0、1、10、50、100μmol/L浓度的BaP同时染毒于原代培养的大鼠支持细胞12h,每个剂量设置6个平行孔。检测支持细胞活力、凋亡蛋白caspase-3活性,以及连接蛋白基因的mRNA表达。[结果]在BaP 50μmol/L时,支持细胞活力降低(和对照组相比,P<0.01);在BaP 10μmol/L时caspase-3活性升高,连接蛋白connexin 43、occludin、和ZO-1基因的mRNA表达降低(和对照组相比,P<0.05)。在BaP 100μmol/L时连接蛋白N-cadherin基因的mRNA表达降低(和对照组相比,P<0.05)。加入caspase-3抑制剂后,BaP所诱导的连接蛋白基因表达下降,且随caspase-3活性变化而发生改变。[结论]BaP能诱导大鼠支持细胞连接蛋白mRNA表达下降,BaP诱导的caspase-3活性上升是调节连接蛋白mRNA表达下降的可能机制。
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Institution复旦大学