黄瓜矮化突变体膨胀素Cs-EXPA1蛋白的表达及活性分析

作者：胡宝忠; 黄莎莎; 李凤兰; 王多佳

来源：东北农业大学学报, 2013, (10): 44-50.

• 膨胀素
• 毕赤酵母
• 黄瓜
• 纤维素
• 协同作用 expansin
• Pichia pastoris
• cucumber
• cellulase
• synergism

采用RT-PCR法从矮化黄瓜D0462中分离膨胀素基因Cs-EXPA1,并将其与毕赤酵母分泌型表达载体pGAPHαM连接,形成重组质粒pGAPHαM-EXPA1。通过电击转化法将重组质粒转化到巴氏德毕赤酵母GS115中,经检测膨胀素基因通过同源重组整合到毕赤酵母染色体上,成功获得重组菌株。该菌株在摇床培养条件下可在上清液中检测到膨胀素蛋白。该蛋白不具有单独水解纤维素的活性,但在纤维素酶水解纤维素时却具有协同水解纤维素的活性。文章初步确定膨胀素协同水解纤维素的最佳时间36 h、最适pH 4.0~5.0、最适温度50℃。研究可为提高纤维素的酶水解效率提供理论参考。

• 单位
  东北农业大学; 生命科学学院