关岭黄牛MSTN启动子真核报告载体的构建与启动活性研究

作者：刘敏; 许厚强; 陈伟; 陈祥; 李飞

来源：广东农业科学, 2013, (17): 133-136.

• MSTN基因
• 启动子
• 荧光素酶
• C2C12
• 3T3-L1 MSTN gene
• promoter
• luciferase
• C2C12
• 3T3-L1

采用PCR技术扩增牛MSTN基因启子,亚克隆至荧光素酶表达载体pGL3-Basic中,构建重组报告载体pGL3-BasicMSTN-promoter。将重组报告载体pGL3-Basic-MSTN-promoter与内参质粒pRL-TK用脂质体法瞬时共转染小鼠成肌细胞系C2C12和小鼠胚胎成纤维细胞3T3-L1,通过双荧光素酶活性检测其启动子活性。测序结果表明,成功构建了牛MSTN基因真核报告载体pGL3-Basic-MSTN-promoter,瞬时转染试验表明,pGL3-Basic-MSTN-promoter在C2C12细胞和3T3-L1细胞中的启动子活性分别为pGL3-Basic空载体的14.53倍、5.02倍。研究结果为进一步研究MSTN基因的表达调控机制奠定了基础。

• 单位
  贵州大学; 生命科学学院