K178M、S170F、G180V突变对木聚糖酶XynZF-2热稳定性的影响

作者：蔡刘滕子; 谢晶晶; 陈亚文; 周晨妍; 李同彪

来源：基因组学与应用生物学, 2018, (04): 1480-1486.

DOI：10.13417/j.gab.037.001480

• 木聚糖酶
• 黑曲霉
• 定点突变
• 热稳定性 Xylanase
• Aspergillus niger
• Site-directed mutagenesis
• Thermostability

利用生物信息学分析黑曲霉木聚糖酶Xyn ZF-2,选择α-螺旋178位点、170位点和180位点氨基酸进行定点突变(K178M,S170F,G180V)获得突变木聚糖酶基因xyn MFV,构建重组表达载体转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)诱导表达。酶学性质分析对比发现,突变酶最适温度(50℃)比原酶(40℃)提高了10℃;40℃条件下保温1 h突变酶Xyn MFV相对酶活力下降到热处理前的56.0%,原酶Xyn ZF-2下降到42.0%;45℃时突变酶Xyn MFV的半衰期t_(1/2)为21 min,与原酶Xyn ZF-2(t_(1/2)=7 min)相比较提高了14 min。结果...

• 单位
  新乡医学院