乙肝病毒X基因可调控表达细胞模型的构建

作者：白荷露; 刘蕊; 朱乃硕

来源：生物技术通报, 2013, (02): 140-145.

• 乙型肝炎病毒基因
• 慢病毒表达载体
• 四环素调控
• 可诱导表达 Hepatitis B virus Lentiviral expression system Tetracycline regulation Inducible expression

利用四环素诱导型慢病毒系统(Lentil-XTMTet-On Advanced Inducible Expression System)构建了含有乙肝病毒X基因(HBx)的可诱导表达载体质粒,利用慢病毒包装细胞系HEK293T细胞分别获得含有调控元件rt-TA和HBx基因的病毒颗粒,滴度达到108LPs/mL。将两种病毒先后感染HepG2肝癌细胞系,分别利用G418和Puromycin抗生素筛选获得整合有HBx基因的稳定细胞株。在体系中加入Dox时,应用RT-PCR和Western blot方法验证了HBx基因的可诱导表达。可诱导表达细胞模型构建成功,为进一步研究HBx基因在对宿主感染致病和免疫耐受中的作用提供了一种较理想的试验模型。

• 单位
  复旦大学生命科学学院