干血滤纸片试剂盒和水煮法提取间日疟原虫DNA用于PCR检测的比较

作者：胡明洁; 吴守伟; 刘辉; 张静; 方强; 沈继龙

来源：蚌埠医学院学报, 2011, (08): 793-795.

• 间日疟原虫
• DNA提取
• 干血滤纸片
• 聚合酶链式反应

目的:比较水煮法和干血滤纸片基因组DNA分离试剂盒提取间日疟原虫DNA用于PCR检测及克隆研究的差异。方法:采集间日疟患者末梢血制备干血滤纸片,分别用水煮法和QIAamp DNAmini kit试剂盒提取间日疟原虫基因组DNA10份。PCR扩增LDH基因,并克隆质粒pGEM-PvLDH。分析比较2种提取方法的差异。结果:水煮法和试剂盒法提取的间日疟原虫gDNA,均扩增出LDH基因特异条带,但试剂盒提取的gDNA目的条带亮于水煮法。结论:水煮法操作简便、快速、经济,在等量血源条件下,所得DNA量较少、纯度较低;试剂盒提取可获得较高的得率,在定量检测和复合扩增时受到的影响因素较少,成功率较高。

• 单位
  蚌埠医学院; 安徽医科大学