摘要
目的构建人乙酰肝素酶重组表达质粒,以期获得足够的乙酰肝素酶蛋白,用于其功能研究。方法将人全长乙酰肝素酶cDNA克隆至原核表达载体pET28a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3)进行体外表达,并探索C-端带一个His标签及C-端、N-端各带一个His标签对乙酰肝素酶表达量的影响。结果重组原核表达质粒能在大肠杆菌中高效表达人乙酰肝素酶蛋白。结论成功构建了人乙酰肝素酶原核表达系统,C-端、N-端均带His标签的表达载体表达的乙酰肝素酶蛋白量明显高于仅在C-端带His标签的表达载体表达的乙酰肝素酶蛋白量。
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单位广东药学院