mir-34a模拟物转染人脑胶质瘤细胞U87对Dll1基因表达的影响

作者：余肖; 张文迪; 宁琴; 罗小平

来源：实用儿科临床杂志, 2011, (15): 1161-1163.

• 微小RNA
• mir-34a
• 转染
• Dll1基因

目的观察mir-34a对人脑胶质瘤细胞U87中Dll1基因和蛋白表达水平的影响,探讨Dll1是否为mir-34a的靶基因。方法将人脑胶质瘤U87细胞分为mir-34a模拟物组、阴性对照组、脂质体组和空白对照组,根据人源mir-34a序列,设计并合成其双链模拟物(mir-34a mimics)。将mir-34a mimics以脂质体Lipofectamine 2000包裹,并转染至人脑胶质瘤细胞U87中,转染后48 h采用实时荧光定量PCR方法检测细胞内Dll1基因mRNA表达水平,Western blot技术检测细胞内Dll1蛋白表达水平。实验数据采用单因素方差分析和t检验进行统计学分析。结果转染后48 h模拟物组、阴性对照组、脂质体组和空白对照组细胞内Dll1基因mRNA相对表达水平分别为1.26±0.09、1.29±0.03、1.10±0.12和1.39±0.08;转染后48 h模拟物组、阴性对照组、脂质体组和空白对照组细胞内Dll1蛋白相对表达水平分别为0.011 34±0.041 90、0.628 09±0.035 00、0.913 28±0.036 20和0.868 60±0.039 00。模拟物组Dll1蛋白表达水平均明显低于阴性对照组、脂质体组和空白对照组(Pa<0.05);而模拟物组Dll1的mRNA表达水平与其他3组比较差异均无统计学意义(Pa>0.05)。结论人脑胶质瘤细胞U87中,mir-34a可通过下调Dll1蛋白而非基因表达水平发挥该靶基因转录后翻译水平的负性调控作用。

• 单位
  华中科技大学