基因改造Rhodobacter sphaeroides提高辅酶Q10的产量

作者：李力; 林丹枫; 黄建忠

来源：微生物学通报, 2013, (04): 593-602.

• 辅酶Q10
• 类球红细菌
• 基因改造 Coenzyme Q10
• Rhodobacter shpaeroides
• Gene manipulation

【目的】通过敲除类球红细菌2.4.1基因组中八氢番茄素合成酶基因crtB,让异戊二烯前体更多流向辅酶Q10的合成。引入大肠杆菌编码的分支酸裂解酶基因ubiC和4-羟苯甲酸转移酶基因ubiA,提高4-羟苯甲酸的合成和与聚异戊二烯的连接,从而提高类球红细菌的辅酶Q10产量。【方法】以自杀型质粒pSUP202为载体,构建包含crtB基因上游2.5 kb片段,壮观霉素抗性基因,ubiC、ubiA基因和crtB基因下游2.5 kb片段的基因置换质粒,利用结合转移方法转入类球红细菌2.4.1中,利用抗性机制筛选双交换突变株,RT-PCR方法检测引入的ubiC和ubiA基因转录。用HPLC方法测定出发菌株和基因改造菌株的辅酶Q10产量。【结果】成功构建出基因置换质粒,筛选出发生基因置换的突变株,RT-PCR证实了外源基因的转录,并且突变株辅酶Q10的产量比出发菌株提高40%。【结论】大肠杆菌的ubiC和ubiA基因能够利用自身启动子在类球红细菌中表达,利用基因改造的方法能成功提高类球红细菌的辅酶Q10产量。

• 单位
  生命科学学院; 福建师范大学