BRMS1 shRNA表达载体的构建及对卵巢癌细胞转移的影响

作者：周映群; 生秀杰; 宋清源; 刘启才

来源：肿瘤基础与临床, 2011, (06): 471-476.

• 卵巢肿瘤
• RNA干扰
• 乳腺癌转移抑制基因1
• miR-146a ovarian neoplasms
• RNA interference
• breast cancer metastasis suppressor 1
• miR-146a

目的探讨乳腺癌转移抑制基因1(BRMS1)表达抑制对人卵巢癌细胞转移能力的影响及机制。方法构建靶向BRMS1基因的短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体pGPU6/GFP/Neo-BRMS1,并转染人卵巢癌OVCAR3细胞,经G418筛选获得稳定转染株。采用实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测BRMS1 mRNA和蛋白的表达,采用黏附实验检测细胞的黏附能力,采用Tr-answell小室法检测细胞的体外侵袭和迁移能力,采用实时荧光定量PCR法检测基因沉默后miR-146a的表达。结果经酶切和DNA测序证明重组载体构建成功。稳定转染BRMS1 shRNA后,OVCAR3细胞中B...

• 单位
  广州医学院; 广州医学院第三附属医院妇产科