抗氯霉素单链抗体的高效生产

作者：李黄金; 陈伟; 赵林; 唐伟

来源：现代预防医学, 2011, (06): 1080.

• 氯霉素
• 单链抗体
• 高效表达
• 复性 Chloramphenicol
• Single chain variable fragment
• Over-expression
• Renaturation

[目的]建立抗氯霉素单链抗体(scFvCAP)的大肠杆菌高效生产体系。[方法]采用重叠延伸PCR法组装scFvCAP,并通过优化5'端序列实现高效表达,采用β-环糊精人工伴侣系统实现SDS变性蛋白的复性。[结果]成功组装scFvCAP基因(Genebank ID:GU258048)。在强启动子T7驱动下,scFvCAP基因独立表达时未见显著表达,而通过同义突变所得突变基因scFvCAP mut(Genebank ID:GU258048)即可高效表达。高效表达所形成的包涵体蛋白可溶于1%SDS-8mol/L尿素溶液,经β-环糊精人工伴侣系统复性后所获scFvCAP具有与母本单克隆抗体相似的亲和力。[结论]成功建立了基于大肠杆菌基因工程系统的scFvCAP高效生产体系。

• 单位
  广东药学院