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乳酸脱氢酶突变体D-LDHY52L在大肠杆菌中的重组表达及其合成D-苯基乳酸的研究

蒋卓越; 季伟; 钱蓓蓓; 朱益波; 齐斌
万方PKUISTIC
常熟理工学院; 苏州大学

摘要

Lactobacillus pentosus D-乳酸脱氢酶的三维构象表明氨基酸序列中第52位的酪氨酸非常接近底物酮酸盐C3位上的基团.该研究利用定点突变技术将第52位的亲水性的酪氨酸替换成疏水性的亮氨酸,有效提高了D-乳酸脱氢酶对底物苯丙酮酸的催化活力.在大肠杆菌中重组表达后,利用重组菌全细胞转化苯丙酮酸合成D-苯基乳酸.结果表明,D-苯基乳酸的产量比未突变菌株提高了46%,产量达18.47 g/L,转化率达65.96%.

关键词

D-乳酸脱氢酶 定点突变 重组表达 苯丙酮酸 D-苯基乳酸