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摘要
为在毕赤酵母表达系统中表达无冗余氨基酸且具有抗病毒活性的鹅干扰素-α(IFN-α)蛋白,采用融合PCR法扩增获得鹅干扰素-α基因片段,将此片段连入pPICZαA载体,构建重组表达质粒pPICZαA-GoIFN-α,电击转化毕赤酵母感受态细胞X33,挑取阳性重组菌用甲醇进行诱导表达,对表达产物进行West-ern-blot和ELISA分析,并测定重组IFN-α的生物活性。结果显示,融合基因获得高效表达,表达的蛋白以可溶形式存在,且相对分子质量较理论值稍大。经GEF-GPMV系统检测,证实表达的蛋白具有生物学活性,约为6.55×105 U/mL,比活力为1.80×105 U/mg。结果表明,利用毕赤酵母表达系统规模化生产具有生物学活性的鹅IFN-α有广阔的应用前景。
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单位东北农业大学
