牛细小病毒VP2基因分段表达及其抗原性分析

作者：罗济冠; 葛俊伟; 姜艳平; 崔文; 乔薪瑗; 唐丽杰; 李一经

来源：中国预防兽医学报, 2013, (07): 546-549.

• 牛细小病毒
• VP2基因
• 表达
• 抗原性分析 bovine parvovirus
• VP2 gene
• expression
• analysis of antigenicity

为研究牛细小病毒(BPV)VP2蛋白免疫学相关功能,本研究采用PCR扩增得到BPV-1VR767株VP2基因片段,测序后利用生物学软件分析VP2蛋白的抗原表位,选取抗原表位富集的3个基因片段VP2-1(100 bp～789 bp),VP2-2(898 bp～1 353 bp)和VP2-3(1 450 bp～1 899 bp)分别克隆至原核表达载体pET-28a中,并转化E.coli中进行诱导表达。表达的重组蛋白经western blot和间接ELISA鉴定;用纯化的重组蛋白分别免疫小鼠,并用ELISA检测小鼠多克隆抗体特异性。结果显示:表达的3种重组蛋白分子量分别约为30.2 ku、22.9 ku和22.7 ku,均可以被BPV阳性血清识别。间接ELISA结果表明,3种重组蛋白均能够有效诱导抗体反应。其中,重组VP2-3诱导产生的抗体效价最高,与阳性血清的结合能力最强。该研究结果为研究VP2蛋白功能、建立BPV检测方法提供了基础材料。

• 单位
  东北农业大学