摘要
观察体外电刺激对大鼠骨髓间充质干细胞(rBMSCs)向心肌样细胞分化的影响。选用第3、4代rBMSCs用于实验。实验分为3组:(1)电刺激组,rBMSCs分别暴露于1、2、4、6V电压,频率2Hz,脉宽5ms的电刺激,2h/d,连续刺激10d;(2)5-氮胞苷(5-Aza)组,给予10μmol/L 5-Aza诱导24h,然后采用完全培养液培养10d;(3)对照组,采用完全培养液培养10d。通过倒置相差显微镜逐日连续观察细胞的生长状况和形态特征;采用实时荧光定量PCR方法检测GATA4,α-肌动蛋白(α-actin),α-辅肌动蛋白(ACTN2),心肌肌钙蛋白T(TNNT2)的mRNA表达;采用免疫荧光染色技术检测TNNT2的蛋白表达。结果显示:电刺激组、5-Aza组的GATA4、α-actin、ACTN2和TNNT2mRNA表达与TNNT2蛋白表达明显高于对照组(P<0.05);提示,电刺激可以促进rBMSCs向心肌样细胞分化,电压2V的电刺激效果最佳。
-
单位广东医学院