新城疫病毒疫苗株F蛋白裂解位点改造对诱导HepG2细胞发生自噬的影响

作者：吴云舟; 安莹; 孙田; 何金娇; 王卉; 朱升龙; 田贵游; 尹杰超; 张天援; 牛泽杉; 倪霁; 曲素素; 刘畅; 李德山

来源：中国预防兽医学报, 2013, (09): 698-701.

• 重组新城疫病毒
• F蛋白
• 自噬 recombinant Newcastle disease virus
• F gene
• autophagy

新城疫病毒(NDV)通过启动不依赖p53的内源性凋亡通路特异性诱导肿瘤细胞凋亡。最新研究表明NDV可以引起U251肿瘤细胞发生自噬,并在后期导致细胞凋亡,但其机理尚不清楚。本研究通过反向遗传操作技术对NDV Clone30疫苗株F蛋白的碱性裂解位点进行突变,将F蛋白的裂解位点由弱毒株的GGRQGR↓L突变为强毒株的GRRQRR↓F基序,并成功拯救出突变改造病毒rC30-FmF。分别将Clone30野生型病毒株rC30-wt与rC30-FmF感染HepG2肝癌细胞,通过透射电镜检测细胞超微结构显示,rC30-FmF感染4 h后细胞内出现大量自噬小体及自噬溶酶体。通过western blot检测自噬标志蛋白LC-3 II表明,rC30-FmF感染4 h后LC3II表达量显著上调,与rC30-wt对照组相比差异极显著(p<0.01)。研究表明,rC30-FmF可以在感染早期增加HepG2细胞自噬程度。从而初步证明F蛋白的裂解位点在诱导HepG2细胞自噬过程中具有关键作用。

• 单位
  东北农业大学; 生命科学学院