表达Omp1和Omp2的猪大肠埃希菌融合菌株R2的构建

作者：张丹琳; 王文豪; 张显浩; 陈瑞爱; 苏丹萍; 贺东生

来源：动物医学进展, 2013, (10): 76-81.

• 猪
• 大肠埃希菌
• 外膜蛋白型
• 原生质体融合
• 融合菌株 swine
• Escherichia coli
• outer membrane protein pattern
• protoplast fusion
• fusion strain

为了构建猪大肠埃希菌融合菌株,在药敏试验和MIC试验的基础上,对猪大肠埃希菌HY2株(O101,Omp1)和GXA1株(O107,Omp2)进行交叉耐药培育。以HY2(O101,Omp1,Ami r,Czl s)和GXA1(O107,Omp2,Czl r,Ami s)为亲本菌株,采用溶菌酶-EDTA法制备两亲本菌株原生质体,通过聚乙二醇(PEG)助融,进行原生质体融合,得到3株双耐药融合菌株。结果表明,猪大肠埃希菌原生质体制备和再生的最适条件是:溶菌酶浓度为200U/mL,作用时间为25min。筛选得到3株融合菌株R1、R2、R3,均可凝集两亲本的O抗原,其中,R2凝集性更好更稳定。进一步结合SDS-PAGE分析,显示融合菌株R2能较好的表达两亲本菌株形状,经多次传代仍能够稳定遗传。

• 单位
  广东大华农动物保健品股份有限公司; 华南农业大学; 空