表达Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒VP1蛋白重组腺病毒的构建

作者：殷秀辰; 刘红玉; 陈玉环; 刘明; 张云

来源：中国预防兽医学报, 2013, (07): 526-529.

• 重组腺病毒
• Ⅰ型鸭病毒性肝炎
• VP1蛋白 recombinant adenovirus
• duck hepatitis virus type Ⅰ
• VP1 protein

为构建表达Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒(DHV-Ⅰ)VP1蛋白的重组腺病毒,本实验采用RT-PCR方法扩增DHV-Ⅰ HP-1株VP1基因,克隆于腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV中,并将其电转化于含腺病毒pAdeasy骨架质粒的大肠杆菌BJ5183中,通过同源重组制备含有重组腺病毒的质粒。重组质粒经PacⅠ酶切线性化后转染AD293细胞,获得重组腺病毒(rAd-VP1)。间接免疫荧光和western blot鉴定结果显示,DHV-Ⅰ的VP1蛋白在重组腺病毒感染的AD293中获得表达。rAd-VP1的制备为鸭免疫实验效果评价奠定了基础。

• 单位
  东北农业大学; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所