人GDNF基因的腺病毒载体构建及其在人神经干细胞中的表达

作者：郁时兵; 肖建德; 刘尚礼

来源：中国脊柱脊髓杂志, 2007, (09): 667.

• 胶质细胞源性神经营养因子
• 神经干细胞
• 基因
• 腺病毒 Glial cell line-derived neurotrophic factor
• Neural stem cells
• Gene
• Adenovirus

目的:观察构建的含人胶质细胞源性生长因子(GDNF)基因腺病毒载体对人神经干细胞的感染及其基因表达情况,为脊髓损伤的基因及神经干细胞治疗提供前期实验依据。方法:从12周龄流产人新鲜胚胎中提取人神经干细胞并进行培养,行Nestin免疫荧光染色进行检验。将全长558bp编码人GDNF的cDNA克隆到重组腺病毒载体质粒,并在人胚肾细胞(HEK293细胞)中包装出含有目的基因hGDNF的腺病毒,然后用该腺病毒感染人神经干细胞,应用荧光显微镜和Western-blot检测病毒感染及外源基因的表达情况,并进行GFAP和Tubulin免疫荧光染色检测神经干细胞向神经细胞分化情况。结果:Nestin免疫荧光染...

• 单位
  深圳市第二人民医院