根癌农杆菌vbp2基因启动子转录调控的探析

作者：徐楠; 徐宇娟; 孙盼; 宗仁杰; 郭敏亮

来源：生物技术通报, 2021, 1-11.

• 根癌农杆菌
• vbp2基因
• 转录调控
• 转录活性
• 荧光蛋白

根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）能够将自身质粒上的部分DNA片段（简称T-DNA）以T-复合物的形式转运、整合至宿主基因组，而用作高效的植物转基因工具。vbp2是编码VBP蛋白的3个同源基因之一，VBP蛋白通过与T-复合物上的VirD2结合参与T-DNA的转运过程。根据生物信息学预测，vbp2基因的启动子区可能含有多个转录调控元件。通过同源重组的方法，将A. tumefaciens染色体上的vbp2基因替换成编码红色荧光蛋白的rfp基因，使vbp2的启动子控制rfp的表达，因此，可通过测定所表达的RFP的荧光强度来表征vbp2启动子的活性。结果表明：乙酰丁香酮（AS）和鼠李糖（Rha）均能诱导vbp2启动子表达RFP,AS和Rha的最佳诱导浓度分别为150μmol/L和100μmol/L。通过截短vbp2启动子DNA片段的方法，证明响应AS和Rha诱导的调控区域分别位于上游的165 bp-260 bp和126 bp-165 bp。

• 单位
  扬州大学