克隆与表达产甲酸草酸杆菌代谢基因Frc及临床意义

作者：赖德辉; 李逊; 雷鸣; 曾国华; 袁坚; 吴文起; 何永忠; 何朝晖

来源：中华腔镜泌尿外科杂志(电子版), 2010, (03): 239-244.

• 产甲酸草酸杆菌
• Frc
• 基因克隆
• 大肠杆菌BL-21 Oxalobacter formigenes
• FRC
• Gene cloning
• E.coli BL-21

目的研究产甲酸草酸杆菌草酸代谢基因Frc转化大肠杆菌BL21后稳定表达代谢草酸相关性酶--甲酰辅酶A转移酶(FCoAT)对草酸的降解效能。方法成功培养产甲酸草酸杆菌后,采用PCR方法从产甲酸草酸基因组中获得Frc基因,克隆到pMDTM19-T载体上进行测序,得到正确的基因片段。经双酶切将目的基因片段插入到原核表达载体PGEX-4T-2上,测序正确后,转化大肠杆菌BL-21,IPTG诱导表达GST-FCoAT融合蛋白,表达产物行western-blot鉴定分析。结果重组克隆载体pMDTM19-Frc经测序鉴定序列正确。成功构建融合原核表达质粒PGEX-4T-2-Frc,大肠杆菌BL21成为载体,...

• 单位
  广州医学院