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用免疫蛋白质组学方法筛选哈氏弧菌免疫反应蛋白

李岩; 庞欢瑛; 鲁义善; 吴灶和; 简纪常
中国知网
广东海洋大学; 中国科学院南海海洋研究所; 中国科学院研究生院

摘要

用免疫蛋白质组学的研究方法鉴定了哈氏弧菌的免疫反应蛋白。将哈氏弧菌接种于TSB培养基28℃培养18h,利用裂解液裂解细菌,提取全菌可溶性蛋白,一向电泳采用7cmpH4~7的胶条进行等电聚焦,二向用12.5%的SDS-PAGE胶分离蛋白质,考马斯亮蓝染色,获得双向电泳图谱,再结合免疫转印技术检测免疫反应的蛋白质,利用ImageMaster 2D Platinum进行配对分析得到15个非特异性的免疫反应性蛋白点,30个特异性的免疫反应性蛋白点。经过鉴定得到13种非特异性的免疫反应性蛋白质,这其中有2对蛋白在胶上的位置不同,但鉴定为同一种蛋白;同时得到28种特异性的免疫反应性蛋白质,有一个蛋白点没有...

关键词

哈氏弧菌 免疫蛋白质组学 全菌可溶性蛋白 双向电泳 Vibrio harveyi immunogenic total soluble proteins two-dimensional electrophoresis