新型抗菌蛋白天蚕素-人溶菌酶在大肠杆菌中的表达条件优化及纯化

作者：卢雪梅; 金小宝; 朱家勇

来源：中国生化药物杂志, 2012, (04): 329-332.

• 家蝇天蚕素
• 溶菌酶
• 重组融合蛋白
• 表达条件
• 纯化 Musca domestica cecropin
• lysozyme
• recombinant fusion protein
• expression condition
• purification

目的探讨重组家蝇天蚕素-人溶菌酶(Mdc-hly)在大肠杆菌中的表达条件及纯化。方法利用SDS-PAGE电泳和BandScan凝胶电泳图像分析系统研究诱导温度、诱导时机、异丙基硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导浓度和诱导时间对融合蛋白表达的影响。融合蛋白经His琼脂糖柱亲和色谱纯化后,Western blot鉴定。结果在起始菌浓度为A600=0.6时加入浓度为1.0 mmol/L的IPTG,37℃诱导6 h,融合蛋白的表达量最高,占菌体总蛋白的39.1%。纯化后融合蛋白纯度可达95%,Western blot鉴定为目的蛋白。结论确定了重组融合蛋白的最佳表达条件,并纯化了目的蛋白。

• 单位
  广东药学院