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检测肺炎支原体的实时荧光PCR方法的建立

谷祯梅; 向春艳; 袁忠; 温淑娟; 林斌; 王海
中国知网
南方医科大学; 空; 广州华银医药科技有限公司

摘要

目的采用Taqman探针技术,组建肺炎支原体荧光PCR基因检测方法。方法对GenBank登录的肺炎支原体的基因序列进行生物信息学分析,针对16S核糖体蛋白基因的保守区域设计引物和探针,组建实时荧光PCR方法检测。采用流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒和腺病毒进行特异性评价。采用倍数稀释的方法进行灵敏度的评价。对来自南方医院的522份临床咽拭子样本进行检测。结果用实时荧光PCR方法检测甲型流感病毒(甲型、乙型)、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、呼吸道腺病毒均无特异性反应。该方法可以检测出稀释浓度约为103/mL的肺炎支原体样本。对本院的临床样本检出39份。结论实时荧光PCR检测肺炎支原体具有较高的...

关键词

肺炎支原体 实时荧光PCR Mycoplasma pneumonia fluorescent real-time PCR