摘要
目的从高温熬制的阿胶制品中提取微量动物源性DNA,建立并优化聚合酶链反应(PCR)方法快速鉴定阿胶中驴源性成分,建立分子生物学鉴定阿胶品质新方法。方法应用DNA纯化柱替代十二烷基硫酸钠-蛋白酶K(SDS-PK)方法中酚、氯仿等毒性较大的有机溶剂提取阿胶中驴源性基因组DNA,并对SDS-PK方法进行优化。结果提取驴源性基因组DNA最佳阿胶样本量为0. 20 g,水浴消化1 h再进行DNA纯化柱处理可快速获得高质量阿胶基因组DNA,纯度均在1. 70~1. 80之间,可达到(187. 8±0. 56) ng·μL~(-1)。应用特异性引物进行PCR扩增、克隆、测序,与Gen Bank已登记的驴物种...
-
单位北华大学