靶向EGFR二聚化界面的肿瘤多肽疫苗P64k-EGFR~(262-328)的构建及免疫原性分析

作者：赵林; 吴梅芝; 陈展歌; 李黄金; 周联

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2013, (06): 647-651.

• EGFR
• 二聚化界面
• 肿瘤疫苗
• P64k
• 免疫原性 EGFR
• dimerization interface
• tumor vaccine
• P64k
• immunogenicity

目的构建靶向EGFR二聚化界面的肿瘤多肽疫苗P64k-EGFR262-328并分析其免疫原性。方法采用重叠延伸PCR来扩增P64k-EGFR262-328融合基因,克隆至pMD18-T,经测序鉴定后与pET-21b构建重组表达载体,并转化大肠杆菌BL21(DE3)。目的蛋白经IPTG诱导表达后用Source Q阴离子层析和Ni-NTA亲和层析纯化,纯化的融合蛋白乳化后免疫BALB/c小鼠分析其免疫原性。结果获得了2 031 bp的融合基因,IPTG诱导后获得了相对分子质量(Mr)70 000大小的目的蛋白,经两步柱层析后,融合蛋白达到了95%以上的纯度,并在小鼠体内产生了高达1∶16 000以...

• 单位
  广东药学院; 广州中医药大学