鸡FBXO38转录剪接体1的克隆、表达和功能分析

作者：张志威; 孙婴宁; 荣恩光; 李辉; 王宁

来源：Progress in Biochemistry and Biophysics, 2013, (09): 845-858.

• F-box蛋白
• KLF7
• 鸡
• 脂肪组织
• 转录调控 F-box proteins
• KLF7
• chicken
• adipogenesis

F-box蛋白(F-box proteins)广泛存在于真核生物,并且成员众多,功能多样.FBXO蛋白是一类C端没有亮氨酸重复序列(leucine-rich repeats,LRRs)和WD重复序列(WD repeats)的F-box蛋白.本研究利用PCR和克隆测序的方法从鸡腹部脂肪组织获得一个未知全长编码区序列(coding sequence,CDS),序列分析显示,该序列是鸡FBXO38的一个转录体,本研究将其命名为鸡FBXO38基因转录本1(gallus gallus FBXO38 transcript variant 1,gFBXO38t1).Real-time reverse transcriptase-PCR分析显示,gFBXO38t1广泛表达于肉鸡多种组织,其中胰腺、回肠和腹部脂肪组织中表达水平较高.进一步分析发现,gFBXO38t1在高、低脂系1~12周龄肉鸡腹部脂肪组织中均有表达,并且在3和4周龄时,低脂肉鸡腹部脂肪组织中gFBXO38t1的表达水平显著高于高脂肉鸡(P<0.05),其余时间点两系间没有显著差异(P>0.05).在鸡前脂肪细胞(stromalvascular cells,SV)诱导分化过程中,gFBXO38t1的表达量随着脂肪细胞分化而呈现下降趋势,此外,gFBXO38t1在前脂肪细胞中的表达量明显高于成熟脂肪细胞(fat cells,FC;P<0.05),暗示gFBXO38t1可能是鸡脂肪组织形成的负调控因子.报告基因分析显示,过表达gFBXO38t1抑制CCAAT增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer-binding proteinα,C/EBPα)、脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)和脂肪酸结合蛋白4(fatty acid-binding protein 4,FABP4)基因的启动子活性(P<0.05),从另一个角度提示了gFBXO38t1对鸡脂肪组织形成具有抑制作用.同时过表达鸡KLF7和gFBXO38t1并不能显著增强过表达gFBXO38t1对鸡LPL、FASN和FABP4基因启动子活性的调控作用,暗示gFBXO38t1对这些基因的调控不完全依赖于鸡转录因子KLF7.本研究为进一步研究鸡脂肪细胞分化和FBXO38的生物学功能提供参考.

• 单位
  齐齐哈尔大学; 东北农业大学