肠炎沙门氏菌rpoS基因缺陷株的构建及其生长特性观察

作者：曾红亮; 曾庆梅; 乔向欣; 杨晋; 刘坤

来源：中国病原生物学杂志, 2013, (08): 690-694.

• 肠炎沙门氏菌
• &lambda
• -red重组系统
• rpoS基因
• 基因敲除
• 生长特性 Salmonella enteritidis
• &lambda
• -red recombinant system
• rpoS gene
• gene knockout
• growth characteristics

目的利用λ-red同源重组系统构建食源性肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis,SE)CICC21482rpoS基因缺陷株SE/⊿rpoS,观察其在胁迫环境中的生长特性,以探讨rpoS基因的生物学作用。方法通过PCR扩增两侧为肠炎沙门氏菌rpoS基因同源臂,中间为卡那霉素抗性基因(kmr)的打靶片段,再电击转入含质粒pkD46的肠炎沙门氏菌中,替换rpoS基因,筛选阳性转化子SE/⊿rpoS并用PCR法验证。结果成功构建了肠炎沙门氏菌rpoS基因缺陷株。在常规LB培养基中37℃培养的缺陷株和野生株生长曲线差异无统计学意义(P>0.05);SE/⊿rpoS菌株在45℃、2%NaCl和pH4.0应激条件下的生存能力较野生株弱(P<0.05)。结论成功构建SE/⊿rpoS基因缺陷株。该基因在肠炎沙门氏菌克服高温、高渗、酸应激时被诱导表达从而发挥作用。此结果为进一步研究rpoS基因在应激过程中的作用机制提供了基础资料。

• 单位
  合肥工业大学