结核分枝杆菌Rv0674蛋白的表达及其多克隆抗体的制备

作者:杨延辉; 董利军; 梁忠喆; 刘通; 张炜; 杨玉荣; 杨志伟
来源:Chinese Journal of Biologicals, 2019, (12): 1370-1376.
DOI:10.13200/j.cnki.cjb.002915

摘要

目的 在大肠埃希菌(E. coli)中表达结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)Rv0674蛋白,纯化后制备多克隆抗体,并检测抗体效价。方法 用PCR技术从MTB H37Rv基因组中扩增Rv0674基因,克隆至pEASY-Blunt E1表达载体后,转化入E. coliBL21(DE3)中,用优化后的IPTG诱导表达条件表达Rv0674蛋白,His trapTMHP亲和层析柱纯化目的蛋白;将纯化的蛋白腹腔注射BALB/c小鼠制备多克隆抗体,ELISA和Western blot法检测抗体效价及特异性。结果 成功获得了Rv0674序列正确的重组质粒pEASY-...

  • 单位
    宁夏医科大学

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