摘要
目的在体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)上,观察α-亚麻酸对高糖致凋亡效应的影响,探讨其发挥细胞内保护作用的信号转导机制。方法体外培养HUVEC,分为4组:(1)对照组(低糖处理组,NG组);(2)高糖处理组(HG组);(3)高糖+α-亚麻酸处理组(HG+ALA组);(4)高糖+α-亚麻酸+3-磷脂酰肌醇激酶(PI3K)阻断剂LY294002处理组(HG+ALA+LY组)。各组在培养终点应用TUNEL法检测细胞凋亡指数(AI);ELISA法检测培养液中NO及·O2的水平;采用Western Blot方法检测内皮细胞Akt的磷酸化程度。结果 (1)HG组、HG+ALA组及HG+ALA+LY组AI较NG组明显升高;HG+ALA组AI较HG组明显降低;HG+ALA+LY组AI较HG+ALA组明显升高(P均<0.01);(2)HG组、HG+ALA组及HG+ALA+LY组培养液NO水平较NG组明显降低,HG+ALA组培养液NO水平较HG组明显升高,HG+ALA+LY组培养液NO水平较HG+ALA组明显降低(P<0.01);而各组培养液中·O2的水平则呈相反变化;(3)HG+ALA组细胞磷酸化的Akt蛋白(pAkt)表达较HG组明显升高(P<0.05);HG+ALA+LY组细胞pAkt蛋白表达较HG+ALA组明显降低。结论α-亚麻酸能够抑制高糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡,该效应可能通过促进细胞内蛋白激酶B(Akt)磷酸化激活来实现,并通过调整内皮细胞的NO/·O2生成平衡,抑制细胞凋亡、发挥细胞保护作用。
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单位中国人民解放军济南军区总医院; 中国人民解放军第四军医大学