人源抗菌肽LL-37的原核表达及活性鉴定

作者：丁静; 沈娟; 朱家勇; 金小宝; 卢雪梅; 梅寒芳; 李小波

来源：生物技术, 2012, (01): 18-22.

• 人源抗菌肽LL-37
• 生物信息学分析
• 原核表达
• 低温诱导
• 抑菌活性 human antimicrobial peptide LL-37
• bioinformatics analysis
• prokaryotic expression
• low-temperature induction
• antibacterial activity

目的:实现大肠杆菌高效可溶表达人源抗菌肽LL-37。方法:LL-37基因克隆至原核载体pET32a,于大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。运用相关生物信息学软件分析重组蛋白Trx-LL-37的理化性质、亲/疏水性、蛋白质二级结构及其可溶表达概率。实验还考察了不同诱导温度对重组蛋白可溶表达比例的影响。结果:生物信息学分析显示,Trx-LL-37分子量21.5kD,理论等电点6.3,物理性质稳定,二级结构简单,具有可溶表达倾向。重组蛋白最佳诱导温度为17℃,与37℃相比,可溶表达比例由37.2%提高至50.2%,并且总表达量也提高了5%左右。抑菌结果显示纯化产物对多种常见细菌的生长具有抑制作用。结论:可采用融合方式通过原核系统高效可溶表达LL-37,为LL-37的功能研究打下基础。

• 单位
  广东药学院