沉香DNA的提取及其ITS2-PCR体系的优化

作者：刘少烽; 陈晓东; 朱爽; 陈晓颖; 钟兆健; 章卫民; 高晓霞

来源：中国实验方剂学杂志, 2015, (02): 7-11.

• 沉香
• DNA提取
• ITS2
• 聚合酶链式反应 Aquilariae Lignum Resinatum
• DNA extraction
• ITS2
• polymerase chain reaction

目的:建立沉香的总DNA提取方法及r DNA第二内转录间隔区序列(ITS2)聚合酶链式反应(PCR)扩增体系。方法:分别采用改良的CTAB法、改良的CTAB法联合DNA提取试剂盒法及DNA提取试剂盒法提取沉香总DNA,利用通用引物ITS2P1/ITS2P2扩增r DNA ITS2目的片段,通过正交试验优选沉香的PCR扩增条件并对目的片段进行测序。结果:改良的CTAB法联合DNA提取试剂盒法提取总DNA的A260 nm/A280 nm1.79,质量浓度350 mg·L-1,PCR扩增目的片段产率最高。不同因素水平对沉香ITS2-PCR反应的影响顺序为模板DNA>引物>Taq DNA聚合酶>d N...

• 单位
  广东药学院; 广东省微生物研究所