表达猪源流感病毒HA基因重组伪狂犬病毒的构建

作者：李敏; 向华; 张丽; 黄元; 王贵平; 宣华

来源：中国人兽共患病学报, 2009, (10): 953-957.

• SIV
• HA基因
• TK-
• 重组PRV SIV
• HA gene
• TK-
• recombinant PRV

目的获得共表达H1N1和H3N2亚型猪源流感病毒(SIV)HA基因的重组伪狂犬病毒(PRV)。方法克隆H1N1以及H3N2亚型SIV的HA基因,将HA基因与PUC-TK转移载体进行酶切、连接来构建pUC-P-H1A-H3A重组表达质粒,用脂质体将其转染已感染PRV亲本病毒的Vero细胞,使其在Vero细胞内与PRV基因组发生同源重组。运用RT-PCR、间接免疫荧光等方法检测外源基因重组情况及其在Vero细胞内的表达,并通过Western-blot对表达产物进行免疫原性鉴定。结果实验结果显示,外源基因HA已重组入PRV基因组,并在Vero细胞中有效表达,且所表达蛋白具有免疫原性。结论HA基因重组...

• 单位
  广东省农业科学院; 吉林大学; 中国人民解放军军事医学科学院