压力对骨髓间充质干细胞(BMSCs)膜片复合富血小板纤维蛋白(PRF)双膜结构中BMSCs成软骨能力的影响

作者：陈慧; 李轶杰; 程百祥; 杜静; 张旻; 陈永进

来源：牙体牙髓牙周病学杂志, 2013, (03): 174-180.

• 压力
• 骨髓间充质干细胞
• 富血小板纤维蛋白
• 软骨形成 pressure
• bone marrow mesenchymal stem cells(BMSCs)
• platelet-rich fibrin(PRF)
• chondrogenesis

目的:观察压力对骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)复合富血小板纤维蛋白(Platelet-rich Fibrin,PRF)(BMSCs/PRF)双膜结构中BMSCs的成软骨能力。方法:密度梯度离心法分离培养兔骨髓间充质干细胞,经表面标记分子检测及成骨、成脂能力鉴定后,制备细胞膜片。将取自同一个体的兔耳廓动脉全血通过离心获得PRF,将PRF压制成膜后与BMSCs细胞膜片复合并进行混合培养。培养2 d后按不同力值将复合膜随机分为0 kPa(对照)、90、120、150 kPa 4大组;每一大组再分为刺激1 h/d、6 h/d两组,然后置于加载装置中按分组分别施以不同静态压力。分别于加载第2、4、6天终止培养、取材;Real-time PCR法检测PCNA、SOX-9、Aggrecan、COL-ⅡmRNA表达水平。结果:实验所设定的各组压力刺激条件均可对双膜结构中的BMSCs产生显著的促增殖效应,其中以120 kPa/1 h持续4 d的压力条件下PCNA基因表达水平最高。2 d压力刺激明显上调Aggrecan水平,而对SOX-9与COL-Ⅱ的表达无显著作用;4 d压力刺激可同时促进Aggrecan、SOX-9及COL-Ⅱ mRNA的表达,其中以120 kPa/1 h/4 d的压力条件下的成软骨基因表达水平最高;6 d压力刺激下仅在90、120 kPa加压1 h时表现出对COL-Ⅱ mRNA的促进作用。结论:适当的压力刺激可明显促进BMSCs/PRF双膜结构中BMSCs的增殖与软骨向分化能力。

• 单位
  中国人民解放军第四军医大学