摘要
建立了一种简单灵敏的棉线快速可视化DNA分析方法。采用碳纳米管/纳米金粒子复合材料修饰发夹型结构DNA探针构建信号探针,DNA探针两端各有8个A碱基,中间序列则与目标DNA链完全匹配,3’端修饰生物素,5’端修饰巯基,在甲氧襞因存在下,DNA探针因为两端的A碱基与甲氧襞因相互作用而形成发夹型结构。当样品中存在目标DNA分子时,纳米复合探针上的DNA发夹型结构被打开,释放出生物素分子,导致纳米复合探针被预先固定于棉线检测区域的链霉亲和素捕获,因而可以观察到棉线检测区域出现黑色条带。在优化条件下,检测区域条带颜色强度与目标DNA浓度在1~100 nmol/L范围内呈良好的线性关系,检出限为0.44 nmol/L(S/N ≥ 3),灵敏度比采用纳米金探针的方法明显提高。此检测装置具有很强的单碱基突变识别能力,可实现与遗传型酪氨酸血症相关的DNA序列的快速可视化检测。
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单位中南林业科技大学; 西北大学