人重组内皮抑素基因的克隆与融合表达

作者：杨芳杨秋芬何援利陈燕英

来源：解放军预防医学杂志, 2005, (03): 182-184.

• 人内皮抑素
• 反转录多聚酶链反应(RT-PCR)
• 融合表达 human endostatin
• reverse transcription-polymerase chain reaction
• fusion expression

目的构建人内皮抑素(endostatin)融合蛋白表达载体,并在大肠杆菌中表达。方法用反转录多聚酶链反应(RT-PCR)得到人内皮抑素全基因,连接PGEM-T载体,测序确认,定向克隆重组入pTRX表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。结果经SDS-PAGE分析,出现特异性蛋白质条带,大小与预期相符合。结论人内皮抑素基因在原核细胞表达载体pTRX中获得成功表达,为应用内皮抑素进行肿瘤的抗血管生成治疗奠定了基础。