硒对砷诱导小鼠皮肤JB6-CI41细胞核因子κB的DNA结合活性体外实验研究

作者：余日安; 贺凌飞; 鲁文清; 李晓暖; 王艺陪; 陈秉; 戴文涛

来源：环境与健康杂志, 2012, (01): 26-29.

• 硒
• 砷
• 核因子&kappa
• B
• 细胞凋亡 Selenium
• Arsenic
• Nuclear factor &kappa
• B(NF-&kappa
• B)
• Apoptosis

目的研究硒对砷诱导小鼠皮肤JB6-CI41细胞核因子κB(nuclear factorκB,NF-κB)的DNA结合活性和细胞凋亡的作用。方法调整JB6-CI41细胞密度为1×105/孔,分别设立对照(生理盐水)组,不同浓度的亚砷酸(3.125、6.25、12.5μmol/L)和亚硒酸钠(2.5μmol/L)单独染毒组,亚硒酸钠(2.5μmol/L)+不同浓度的亚砷酸(3.125、6.25和12.5μmol/L)联合染毒组,NF-κB特异化学抑制剂二乙基二硫代氨基甲酸盐(diethyldithiocarbamate,DTTC,100μmol/L,提前染毒2 h)+亚砷酸(6.25μmol/L)联合染毒组。采用凝胶阻滞电泳法(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测NF-κB的DNA结合活性,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 2.5μmol/L亚硒酸钠对小鼠皮肤JB6-CI41细胞NF-κB的DNA结合活性和细胞凋亡无显著影响(P>0.05)。6.25和12.5μmol/L的亚砷酸能够增强小鼠皮肤JB6-CI41细胞NF-κB的DNA结合活性(P<0.01),具有明显剂量-效应关系(r=0.942 6,P<0.01)。3.125、6.25和12.5μmol/L亚砷酸诱导小鼠皮肤JB6-CI41细胞凋亡(P<0.01),呈现显著剂量-反应关系(r=0.991 8,P<0.01)。NF-κB的DNA结合活性与细胞凋亡率呈显著正相关(r=0.977 5,P<0.01)。2.5μmol/L亚硒酸钠能抑制6.25和12.5μmol/L亚砷酸作用下的小鼠皮肤JB6-CI41细胞NF-κB的DNA结合活性(P<0.01),对3.125、6.25和12.5μmol/L的亚砷酸引起的小鼠皮肤JB6-CI41细胞凋亡率也表现出显著抑制作用(P<0.01)。100μmol/L的DTTC对6.25μmol/L亚砷酸引起的小鼠皮肤JB6-CI41细胞NF-κB的DNA结合活性和细胞凋亡率具有显著抑制作用(P<0.01)。结论在本实验中,一定剂量(6.25～12.5μmol/L)的砷能够使小鼠皮肤JB6-CI41细胞NF-κB的DNA结合活性显著增高并诱导细胞凋亡,2.5μmol/L的硒能抑制砷引起的NF-κB的活化和细胞凋亡。

• 单位
  广东药学院; 华中科技大学