用高效液相色谱法检测鸡胚组织基因组DNA甲基化水平变化规律

摘要

本试验旨在优化用于基因组DNA甲基化水平检测的高效液相色谱法,并初步探索鸡胚发育过程中不同组织基因组DNA甲基化水平的变化规律。首先,试验从DNA酶解体系和高效液相色谱仪检测条件2个方面改进基因组DNA甲基化水平检测方法;然后,以孵化第8、11、14和17天的科宝500肉鸡胚胎为材料,利用改进的高效液相色谱法测定心脏、肝脏和肌肉的基因组DNA甲基化水平。结果表明:3种组织的基因组DNA甲基化水平均随胚龄增加而升高,且鸡胚发育后期(孵化第17天)肝脏的甲基化水平显著高于心脏和肌肉(P<0.05);各胚龄心脏和肌肉的基因组DNA甲基化水平均差异不显著(P>0.05)。结果提示,优化后的高效液相色谱法为快速、准确地获取组织基因组DNA甲基化水平奠定了基础;随着鸡胚发育的进行,基因组DNA甲基化水平逐渐升高,且在胚胎发育后期肝脏甲基化水平较高。

关键词