藜ISSR-PCR反应体系的优化

作者：张恒庆; 朱立南; 杜洋; 贾俊玲; 谭琨

来源：沈阳师范大学学报(自然科学版), 2011, (02): 264-266.

• 藜
• ISSR-PCR
• 反应体系
• 优化

采用TaKaRa的PCR反应系统,以从藜(Chenopodium album L)幼叶中提取纯化后的总DNA为模板,进行UBC 859号引物的ISSR-PCR扩增实验,分别测试了镁离子、模板DNA和Taq DNA聚合酶含量对反应结果的影响,通过各因子的浓度梯度组合实验,确定了在25 mL体积的PCR反应中:酶配套缓冲液2.5μL,dNTPs0.2μmmol/L,引物0.2 mmol/L,Mg2+1.5 mmol/L,模板含量为40 ng,Taq DNA聚合酶为1.5 U是藜最佳的ISSR-PCR反应体系。

• 单位
  生命科学学院; 辽宁师范大学