嗜热链球菌codY基因启动子的克隆及功能验证

摘要

为研究转录调控蛋白codY基因启动子的功能,首先从嗜热链球菌KLDS3.0503中克隆出codY基因启动子,将该启动子连入启动子探针型载体pNZ273的gusA基因上游,获得重组质粒pNZ273/codY。通过分析嗜热链球菌KLDS3.8501携带的质粒p3.8501-1的全序列后,将p3.8501-1质粒的复制区段与pNZ273/codY质粒中氯霉素抗性基因、codY基因启动子和gusA基因的片断连接到一起,电转化入嗜热链球菌KLDS3.0503中,获得重组质粒pST1。在乳酸乳球菌和嗜热链球菌中,该启动子均能启动下游gusA基因的表达,并且当菌株生长到对数生长期时,才检测到β-葡糖苷酸酶的活性。这说明codY启动子凭借自身的调控机制可以起到诱导型启动子的作用,并能控制外源基因的表达。

关键词