中性内切-β-葡聚糖酶基因在里氏木霉中的重组与表达

摘要

隆到一个中性内切-β-葡聚糖酶基因，将该基因置于里氏木霉(Trichoderma reesei)纤维二糖水解酶 I 强启动子Pcbh1(及其信号肽)和终止子 Tcbh1 之间，并以 pCAMBIA1300 为载体骨架构建重组质粒 pCB-PHT。采用根瘤农杆菌介导转化技术将重组质粒 pCB-PHT 导入里氏木霉的分生孢子中，进一步筛选得到八个重组里氏木霉转化子。摇瓶发酵培养 72 h 时，发酵液的中性内切-β-葡聚糖酶活力最高可达到 98.8 IU mL 1左右，是出发菌株的 5.1 倍。研究成功地实现了外源中性内切-β-葡聚糖酶在丝状真菌里氏木霉中的重组与胞外表达，有关研究结果将在牛仔布水洗工业中发挥出重要作用。

关键词