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冰川表层雪样中微生物总DNA几种提取方法的比较研究

闫沛迎; 侯书贵; 陈拓; 张淑红; 孙维君
中国知网
南京大学; 商丘师范学院; 中国科学院寒区旱区环境与工程研究所

摘要

通过对4种具有不同裂解方式的微生物总DNA提取方法的比较,筛选出较佳的方法进行滤膜处理、DNA抽提及沉淀的优化,再将优化出的传统DNA提取方法与商业化试剂盒提取方法比较.结果表明:商业化试剂盒提取总DNA的方法适用于冰川表层雪微生物总DNA的提取;其次,将滤膜剪碎,用溶菌酶(5mg.mL-1)+蛋白酶K(1mg.mL-1)+CTAB(1%)+SDS(1%)的裂解方式,氯仿:异戊醇(24∶1)抽提一次,乙醇沉淀DNA的提取方法是一种效果较佳且廉价的冰川表层雪微生物总DNA提取方法.

关键词

冰川表层雪 微生物总DNA 方法优化