八字地老虎GOBP1基因的克隆、序列分析与原核表达

作者：王舒; 韩岚岚; 赵寅; 赵奎军

来源：大豆科学, 2013, (04): 467-472.

• 大豆
• 八字地老虎
• 克隆
• 原核表达
• 序列分析 Soybean
• Agrotis c-nigrum
• General odorant binding protein 1
• Cloning
• Prokaryotic expression
• Sequence analysis

GOBP1蛋白作为昆虫化学感受机制的重要蛋白,对于研究气味调控防治害虫有重要意义。采用RT-PCR技术以八字地老虎的触角总RNA为模板进行克隆得到1条1 260 bp的八字地老虎GOBP1基因片段(GenBank登录号为JX978464),编码161个氨基酸残基,预测分子量约为18.6 kD,等电点5.14。生物信息学在线预测分析表明:八字地老虎GOBP1核苷酸序列与黄地老虎Agrotis segetum(登录号为DQ838577.1)同源性最高,为97%,与其他昆虫的同源性达80%以上。构建了重组表达质粒pET21-b/Acni GOBP1原核表达后检测到18.6 kD的外源蛋白,Western bolt检测该蛋白是目的蛋白。结果为深入研究GOBP1基因以及通过气味调控防治害虫提供了基础资料。

• 单位
  东北农业大学