EGFR二聚化B细胞表位抗原肽基因克隆、表达与纯化

Authors：朱磊; 吴梅芝; 赵林; 黄绮玲; 梁梅; 李黄金

Source：免疫学杂志, 2011, (10): 918-920.

• 表皮生长因子受体
• 二聚化
• B细胞表位
• 抗原肽
• 高效制备 EGFR
• Dimerization
• B cell epitope
• Antigen peptide
• High performance preparation

目的利用基因工程手段建立表皮生长因子受体(EGFR)二聚化B细胞表位抗原肽MVF-ER的高效制备方法。方法采用重叠延伸PCR扩增MVF-ER后克隆于表达载体pET32a,于大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,产物采用肠激酶酶切和镍离子螯合亲和层析法纯化。结果通过10对引物5步重叠延伸得到273 bp的扩增产物,目的基因与硫氧环蛋白(Trx)融合后可高效表达,经酶切和层析后得到纯度为95%的抗原肽。结论成功建立抗原肽"MVF-ER"的高效制备方法,为进一步研究EGFR过表达恶性肿瘤的治疗性疫苗打下了坚实基础。

• Institution
  广东药学院