靶向Ku70基因si RNA对人肺腺癌细胞顺铂耐药性的逆转作用

作者：黎萍; 张捷; 李亚荣; 王珂; 苏振中

来源：吉林大学学报(医学版), 2012.

目的: 研究Ku70与人肺腺癌耐药的相关性, 观察调控Ku70表达能否逆转人肺腺癌耐药细胞系(A549／DDP) 的耐药性。方法: 采用RT- P CR、West er n Bl ot ti ng方法比较Ku70在人肺腺癌亲代细胞(A549) 与耐药细胞系(A549／DDP) 的表达水平。转染靶向Ku70基因si R NA(si- Ku70) 的A549／DDP细胞作为实验组, 转染非特异性si R NA(si- Scr a mbl e) 的A549／DDP细胞作为阴性对照组, 同时设空白组( 含A549／DDP细胞) 。加药组在转染后48 h给予顺铂。应用MT T法检测各组细胞在顺铂作用下的生存率, 并计算半数抑制浓度(I C50) , 采用流式细胞仪定量检测细胞凋亡率; 采用分光光度法检测Cas pase- 3活化程度。结果:Ku70 mRNA和蛋白在A549／DDP细胞表达 水 平 显 著 高 于 其 亲 代A549细 胞 (P ＜0. 01) ; 靶 向Ku70的si R NA(si- Ku70) 明 显 下 调A549／DDP细胞的Ku70 mRNA和蛋白表达水平(P ＜0. 01) ; 在不同浓度顺铂作用24 h后, 实验组细胞的生存率明显低于阴性对照组和空白组(P ＜0. 01) 。6 mg·L 1顺铂作用24 h后, 实验组细胞凋亡率及Cas pase- 3活化程度高于阴性对照组和空白组(P ＜0. 05) 。结论:Ku70在人耐药肺腺癌细胞呈现高表达, 提示Ku70参与肺腺癌耐药的形成; 靶向Ku70si R NA导入人肺腺癌耐药细胞可特异性下调Ku70的表达, 促进肺腺癌耐药细胞凋亡,逆转其耐药性,Ku70可能成为逆转肺癌耐药的一个新的分子靶点。

• 单位
  吉林大学